RFLPのソースを表示
←
RFLP
移動先:
案内
、
検索
あなたには「このページの編集」を行う権限がありません。理由は以下の通りです:
要求した操作を行うことは許可されていません。
このページのソースの閲覧やコピーができます。
'''RFLP'''('''R'''estriction '''F'''ragment '''L'''ength '''P'''olymorphism、制限酵素断片長多型)とは、[[制限酵素]]によって切断された [[デオキシリボ核酸|DNA]] 断片の長さが、同一[[種 (分類学)|種]]内の個体間で異なる([[多型]]を示す)ことを指し、また転じてそれを検出する手法も意味する。[[一塩基多型]]によってこの違いが現れることもある。[[遺伝病]]を持つ人と持たない人でこれが異なる場合があり、診断や遺伝病の原因[[遺伝子]]の同定に利用される。得られた断片長は、[[電気泳動]]によって既知の断片長の[[デオキシリボ核酸|DNA]](サイズマーカー<!--のことでいいでしょうか?-->)と比較して求める。 [[ゲノムプロジェクト]]の進行に伴って[[ポリメラーゼ連鎖反応|PCR]]に用いる[[プライマー]]の設計が容易になったため、現在ではPCRでDNAを増幅し、その反応生成物を制限酵素で切断する手法であるPCR-RFLPが一般的となった。PCR-RFLP以前は[[ヒト]]を対象とした場合、 # 生きた[[細胞]]の採取 # 細胞の培養(数日) # 比較的高品質なDNAの抽出 # DNAの切断 # 電気泳動 # ブロッティング # [[放射性同位元素]]等でラベルした[[プローブ]]のハイブリダイズ # X線フィルムへの感光・現像 といった手順を踏んだ。一方、PCR-RFLPでは、 # 比較的粗雑なDNAの採取 # PCR(2時間程度) # DNAの切断 # 電気泳動 # 紫外線によるDNAの可視化 と、半日程度で可能となった。 == 断片長の差で[[対立遺伝子]]等を識別する方法 == 以下に[[サザンブロッティング]]を利用した原法を模式的に示す。 個体A a b c | 2 kb | 1 kb | DNA -----------|---------------------|---------|------- SfaN I SfaN I SfaN I ========= プローブと相補的な領域 個体B a b c | 3 kb | DNA -----------|-------------------------------|------- SfaN I SfaN I ========= サザンブロッティングの結果 ↓ 5 kb _____ 4 kb _____ 3 kb _____ ______ 2 kb _____ ______ 1 kb _____ サイズ 個体A 個体B マーカー 上段: ある生物種2個体のゲノムDNAと制限酵素SfaN Iによる断片長。 個体Bにはbの位置の制限酵素認識部位が存在しない==はプローブが結合する領域。 下段: サザンブロッティングの結果。個体Aでは2 kbの、個体Bでは3 kbの位置にバンドが見える。 (簡略のため一倍体生物を想定している) [[Category:酵素]] [[Category:分子生物学]] [[Category:生物学の研究技術]]
RFLP
に戻る。
案内メニュー
個人用ツール
ログイン
名前空間
ページ
議論
変種
表示
閲覧
ソースを表示
履歴表示
その他
検索
案内
メインページ
コミュニティ・ポータル
最近の出来事
新しいページ
最近の更新
おまかせ表示
sandbox
commonsupload
ヘルプ
ヘルプ
井戸端
notice
bugreportspage
sitesupport
ウィキペディアに関するお問い合わせ
ツール
リンク元
関連ページの更新状況
特別ページ
ページ情報